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技術文章
產品特點
◎逆轉錄和定量PCR在一個反應管內一步完成，操作簡便快速；
◎使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應特異性高，有效避免了非特異擴增；
◎反應緩沖液經充分優化，靈敏度高，zui低可檢測1pg總RNA中的目標片段,特別適合低拷貝RNA的檢測。
產品介紹
BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit專為以RNA為模板的定量PCR檢測而設計。使用BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit，逆轉錄和定量PCR在一個反應管內一步完成，中間無開管和移液動作，操作非常簡便，也大大提高了實驗的效率，并降低了反應的污染風險。BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit使用我們研制優化的緩沖液，確保了RT和定量PCR反應能夠快速、地完成。BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit的檢測靈敏度可達到1pg總RNA，與其它品牌的同類產品相比，具有更高的檢測靈敏度。各反應成分以Master Mix的形式提供，非常方便實驗者使用。
產品成分 反應體系
組 分 | 100個反應 | 250個反應 |
RNase free ddH2O | 1ml | 1.25ml×2 |
2×BIOGHC Elitefast SYBR Mix | 1ml | 1.25ml×2 |
BIOGHC Elitefast Enzyme Mix | 100μl | 250μl |
50×ROX Reference Dye | 40μl | 100μl |
2xBIOGHC Elitefast SYBR Mix | 10μl |
BIOGHC Elitefast Enzyme Mix | 1μl |
上下游引物 (10μM) | 各0.4μl |
模板RNA | 10ng-1μg |
50 × ROX | 0.4μl |
RNase free ddH2O | 加至20µl |
說明：1、BIOGHC Elitefast SYBR Mix包含dNTP Mix、Mg2+、SYBR Green I；BIOGHC Elitefast Enzyme Mix包含BIOG超級逆轉錄酶、RNase 抑制因子和BIOG熱啟動聚合酶。2、一般來說反應體系中引物終濃度為0.2μM可得到較好的擴增效果。當反應結果不理想時，可以在0.1-1.0μM范圍內調整引物濃度。3、qPCR反應靈敏性高，模板量的準確性對結果影響很大，建議將模板適度稀釋后加入。4、擴增產物長度請選擇在100bp-500bp范圍內。 6、反應條件：先于50℃逆轉錄反應30分鐘，再于95℃加熱10分鐘，以激活熱啟動DNA聚合酶，然后95℃ 15秒，60℃ 35秒，進行40個循環。該反應條件可根據目標片段的大小、引物的Tm值等適當調整。
儲存和穩定性
干冰或藍冰運輸，-20°C避光保存，避免反復凍融 。
有效期
-20℃保存條件下，有效期為1年。
質量控制
所有組分經檢測均無核酸外切酶，核酸內切酶，RNase殘留。
注意
本產品僅用于科研
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