熒光定量PCR技術服務
熒光定量PCR 實時熒光定量PCR技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,已成為*的核酸分子定量的標準方法,目前在基因表達研究和臨床疾病檢測等領域已得到廣泛應用,常州百代生物使用SYBR Green法或者Taqman 法對 DNA/RNA 進行定量測定或型的鑒定。
SYBR Green熒光染料法:適用于任何DNA,無需設計探針,采取雙標準曲線法,實驗周期短,結果重復性好,靈敏度高。
TaqMan熒光探針法:經驗豐富的實驗技術人員設計探針,對目標基因有高特異性,實驗重復性好,相對于SYBR Green法,靈敏度更高。
服務流程
1、根據基因序列設計特異性的引物或熒光探針
2、提取樣品 DNA/ RNA、電泳、反轉錄
3、熒光定量PCR,進行擴增曲線、溶解曲線、表達量差異分析等實驗
4、實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料
熒光定量PCR服務要求:
1. 請您提供新鮮的且盡量多的材料(各種材料的RNA提取量請參照“總 RNA 的提取”),或直接提供純化好的總RNA(大于5 ug/樣品);(各種材料的DNA提取量請參照“DNA的提取”),或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品) 。
2. 請通過提供已知的全長基因序列。
3. 請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA來源 、豐度等
樣品類型 | 細胞 | 組織 | 全血 | 血漿 | RNA | DNA |
樣品zui少量 | 106 | 100mg | 500ul | 500ul | 5ug | 5ug |
*保護劑 | Trizol | Trizol | 肝素 | 檸檬酸 | Rnase-Free水 | 無 |
運輸條件 | 液氮/干冰 | 干冰 | 干冰 | 干冰 | 干冰 | 冰袋 |
熒光定量PCR操作程序:
1. 根據基因序列設計特異性的引物和熒光探針。
2. 提取DNA/RNA 。
3. Real Time PCR(熒光定量PCR),進行實驗結果分析
4. 實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料